一、转基因产品检测的工作流程SICOLAB

转基因产品检测的工作流程为：实验室样品到样验收（确定是否具备检验的基本条件）→混样→获取测试样品→测试样品的制备（待检状态）→核酸和（或）蛋白等目标物质的提取→PCR实验（包括扩增和产物分析）和（或）蛋白质检测→结果判定→结果表述，出具检验报告。

二、实验室测试样品的要求SICOLAB

转基因产品检测所接收的待检样品应置于原始包装袋（或容器）中，不能接收从其他检测、检验等分出来的样品，以避免样品间交叉污染。

三、实验室设施和环境要求SICOLAB

1、用于转基因产品检测实验室的设施和坏境要求应符合G5/T15481-2000的规定。

2、用于核酸检验的转因产品检测实验室，有条件的宜在所分隔的各工作区域设置缓冲间，缓冲间的压力为负压（或上设抽风装置），与其工作相连的工作间为正压，工作间与缓冲间之间宜安装磁性连锁装置。受实验场所限制而无条件设置缓冲间的实验室，在对检测区域进行功能划分后，应根据本文第四条屮的规定设置实验室的压力。非实验人员不应进入各实验工区。

3、不同功能的核酸检验工作区应是分隔独立的工作室，并有明显的标志，各区间不能直通。各区之间如果是紧密相连，需安装物品传递舱。

4、每个工作区域的顶部应安装紫外灯，紫外灯的波长为254nm，安装数量为每20m2安装一支40W的紫外灯，灯与地面的距离不宜超过2.0m±0.1m

四、实验室工作顺序SICOLAB

所有实验操作应在规定的区域进行，待检样品的流动应遵照转基因产品检测工作流程的顺序，严格按单一方向进行。

五、实验室功能间内容SICOLAB

（一）核酸检验区

1、试剂贮存和准备区

a）主要功能：原装试剂和配制试剂的贮存，所有试剂的配制与分装。

b）工作区域的压力要求：未设缓冲间的试剂贮存和准备区，工作区域为正压。

c）注意事项：当试剂经质检合格后，应将其分装贮存备用，贮存试剂的分装体积根据通常在实验室内一次测定所需的扩增反应数决定。用于扩增的试剂应冰冻贮存。

2、样品制备区

a）主要功能：实验室样品的混样和测试样品的制备。

b）工作区域的压力要求：未设缓冲间的样品制备区，工作区域为负压或减压，可安装排风系统。

c）注意事项：此区应远离其他实验操作区；粉碎样品时的器皿应单独使用，所用的器具在使用前经过彻底清洗并高压消毒，防止交叉污染；称取的测试样品应加盖后再移至样品核酸制。

3、核酸制备区

a）主要功能：核酸的提取纯化与贮存；核酸含量的测定；测试样品DNA的保存。

b）工作区域的压力要求：未设缓冲间的核酸制备区，工作区域为负压或减压，可安装排风系统。

c）注意事项：已纯化的核酸应保存于-20℃或-80℃，避免反复冻融；阳性和阴性标准物质DNA可调整至常用的使用浓度后分装并冷冻保存。

4、扩增区

a）主要功能：PCR扩增反应体系的配制和模板的加入，核酸扩增。

b）工作区域的压力要求：未设缓冲间的扩增区，工作区域为负压或减压，可安装排风系统

c）注意事项：严格限制无关人员出入并减少在本区内走动；加样应在超净工作台（生物安全柜）内进行，超净工作台的气流方向宜选择垂流式；巢式PCR的第二次加样必须在此区进行。

5、扩增产物分析区

a）主要功能：扩增产物的测定。

b）工作区域的压力要求：未设缓冲问的扩增产物区，工作区域为负压或减压，应安装排风系统。

c）注意事项：此区是最主要的扩增产物污染来源，应远离其他实验操作区；使用 PCR-ELISA方法检测扩增产物时，应使用洗板机洗板。

注：若实验仅采用全自动扩增检测仪（如实时荧光定量PCR仪），可将扩增区与扩增产物分析区合并为一个区。

（二）蛋白质检验区

1、蛋白质分离纯化区

本工作区域的功能是用于蛋白质的分离与纯化。蛋白质纯化应具备低温工作的场地，如4℃冷房和（或）层析柜等。

2、蛋白质检测区

本，作区域的功能是蛋白质分析检测。

3、其他区域

可设置洗涤消毒空【洗涤、消毒、制备纯水或双蒸水、制冰等】、高速/超高速离心机室、低温/超低温冰箱室等。
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